Métodos de avaliação de alterações cromatínicas em espermatozoides de garanhão, touro e galo

por Renata Zanon
Publicado: 25/10/2023 - 14:37
Última modificação: 25/10/2023 - 14:37

Alterações na cromatina espermática de reprodutores são reconhecidamente importantes causas de problemas de fertilidade. No entanto, a avaliação destas alterações ainda não é rotina na veterinária. Isso se deve principalmente por não existir métodos simples, de baixo custo, de alta repetibilidade, de reconhecida eficiência e de comprovação de alta correlação com a fertilidade. O método SCSA (Sperm chromatin structure assay) é considerado o método ouro para avaliação de alterações cromatínicas, no entanto, é de baixa repetibilidade, alto custo e com resultados frequentemente questionáveis. No caso de aves, este método não é padronizado. O presente trabalho pretende testar, aprimorar e criar variações de métodos de avaliação de alterações da cromatina espermática, bem como verificar sua eficiência na detecção de alterações na fertilidade em touros, garanhões e galos. Para isso, serão utilizadas amostras de sêmen de garanhão de uma central de reprodução equina, amostras congeladas de sêmen de touros com diferentes níveis de fertilidade e amostras de sêmen de galo de lotes de matrizes pesadas com diferentes resultados na eclosão de ovos. Todas as amostras serão avaliadas com SCSA, TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling), teste de cometa, microscopia eletrônica de transmissão e com esfregaços de sêmen corados com azul de toluidina, corados com alaranjado de acridina e corados com reação de Feulgen, avaliados visualmente e por análise de imagem computacional. Em todos esses métodos deverão ser testadas variações com o intuito de melhorar a eficácia e a repetibilidade. Os resultados de cada método serão correlacionados com taxas de clivagem e de blastocistos na produção in vitro de embriões, com a taxa de prenhes em éguas e com taxas de fertilidade e eclosão dos ovos, respectivamente para sêmen de touro, garanhão e galo. Isso demonstrará qual método tem melhor eficiência na detecção de alterações que verdadeiramente interferem na fertilidade. 

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